蛋白质检测

Western Blot检测（蛋白印迹杂交）

Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离的蛋白质样品，通过转膜方式转移到固相载体(如PVDF、NC膜)上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记(通常是HRP)的第二抗体起反应，经过底物化学发光试剂(如ECL)发光以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。

ELISA( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )，酶联免疫吸附测定

ELISA 是一种结合抗原、抗体特异性反应和酶对底物高效催化作用的高敏感性免疫学实验技术。ELISA 的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应，洗涤使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开，再加入酶标记的抗原或抗体，通过反应使其结合在固相载体上。此时固相上的酶含量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。